山西农业大学学报(自然科学版)

2018, v.38(10) 31-36

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响应面法优化紫球藻原生质体的制备
Optimization of protoplast production fromPorphyridium cruentum with response surface method

蒲洋;丁涓;彭炜航;孙静;王艳华;

摘要(Abstract):

[目的]优化紫球藻细胞原生质体制备条件。[方法]利用Box-Benhnken的中心组合实验设计,进行三因素三水平的实验设计。[结果]得到二次回归方程:Y=55.10+5.19X1-0.075X_2+1.76X_3-0.85X_1X_2-3.13X_1X_3-4.20X_2X_3-9.09X_1~2-6.66X_2~2-7.49X_3~2,确定了混合酶浓度(X1)、纤维素酶和果胶酶的比例(X2)和pH(X3)三因素对紫球藻原生质体制备率(Y)的组合效应,得到了混合酶浓度2.2%、纤维素酶与果胶酶体积比2∶3、pH 7、渗透压稳定剂为0.2mol·L-1 KCl、30℃下轻微振荡、酶解6h的最优制备条件,在此条件下得到68.5%的原生质体制备率。[结论]本研究提高了紫球藻原生质体的制备率,能够满足后续基因工程和遗传育种研究的需要。

关键词(KeyWords): 紫球藻;原生质体制备;响应面分析;条件优化

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 山西省煤基重点科技攻关项目(FT2014-01);; 鲁东大学科研启动基金(ly2014041)

作者(Author): 蒲洋;丁涓;彭炜航;孙静;王艳华;

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