山西农业大学学报(自然科学版)

2018, v.38(03) 23-29

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杜氏盐藻DsFAD2基因的鉴定及缺氮胁迫下表达分析
Identification of DsFAD2 gene in Dunaliella Salina and its expression analysis under nitrogen-deficiency stress

宋亚楠;安茜;岳敏;赵熙宁;刘宝玲;薛金爱;李润植;

摘要(Abstract):

[目的]w-6脂肪酸去饱和酶2(FAD2)催化油酸(18∶1)去饱和形成亚油酸(18∶2),是多不饱和脂肪酸合成过程中的第一个关键酶。为了探究DsFAD2在盐藻油脂合成积累中的作用。[方法]本文以运城盐湖分离的富油杜氏盐藻(Dunaliella salina)株系(YC-011)为材料,利用高保真PCR技术克隆盐藻DsFAD2基因,并对DsFAD2编码蛋白进行了跨膜区、高级结构及氨基酸序列比对等一系列生物信息学分析。应用qRT-PCR检测DsFAD2基因在氮(N)胁迫培养条件下的表达模式。[结果]DsFAD2蛋白定位于内质网中,有5个跨膜区,具有典型膜结合蛋白的结构特征。此外,DsFAD2也具有所有FAD2蛋白家族所特有的3个组氨酸保守区和芳香族氨基酸序列。系统发育分析发现杜氏盐藻DsFAD2与莱茵衣藻CrFAD2、团藻VcFAD2亲缘关系最近。qRT-PCR表明,与正常培养的杜氏盐藻相比,缺N培养显著诱导DsFAD2上调表达,N胁迫8d时DsFAD2的表达量是未胁迫对照的2.8倍。[结论]DsFAD2参与杜氏盐藻N胁迫响应,促进多不饱和脂肪酸形成,增强藻细胞抗逆性。本研究为进一步解析N胁迫条件下藻细胞油脂富集及响应分子机制提供了科学参考。

关键词(KeyWords): 杜氏盐藻(Dunaliella salina);;ω-6脂肪酸去饱和酶2(FAD2);;不饱和脂肪酸;;缺氮胁迫

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家自然科学基金(31401430);; 国家农业部“948”项目(2014-Z39);; 山西省煤基重点科技攻关项目(FT-2014-01);; 山西省重点研发计划重点项目(201603D312005)

作者(Author): 宋亚楠;安茜;岳敏;赵熙宁;刘宝玲;薛金爱;李润植;

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